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免疫熒光

Brdu染色

服務(wù)介紹:


可代替胸腺嘧啶在DNA合成期(S),滲入正在復(fù)制的DNA分子,活體注射或細(xì)胞培養(yǎng)加入,而后利用抗Brdu單克隆抗體,ICC染色,顯示增殖細(xì)胞。同時(shí)結(jié)合其它細(xì)胞標(biāo)記物,雙重染色。



實(shí)驗(yàn)結(jié)果展示:

  小鼠腦-Brdu



實(shí)驗(yàn)流程:

1.加破膜液破膜20min;

2.DAPI染核8min

3.4%的多聚甲醛固定10min;

4.用純水稀釋鹽酸(鹽酸:純水=1:7),滴加到爬片上37℃孵育40min;

5.4%的多聚甲醛固定10min;

6.3%BSA封閉,孵一抗4℃過夜,PBS沖洗3次;

7.孵二抗50min PBS沖洗3次;

8.滴加一滴抗熒光淬滅封片劑封片,顯微鏡觀察

備注:組織樣本的BRDU染色,可以按照常規(guī)的免疫熒光流程進(jìn)行操作,不需要用鹽酸處理。 細(xì)胞樣本的BRDU染色,則需要嚴(yán)格按照以上的步驟進(jìn)行。



送樣運(yùn)輸要求:

  1.組織樣本放置于20倍樣本體積的固定液中固定24h以上,常溫運(yùn)輸送樣。

  2.石蠟切片常溫保存運(yùn)輸

  3.冰凍切片-20℃保存運(yùn)輸

  4.細(xì)胞爬片PFA固定15min后用無菌PBS洗滌后用無菌PBS浸泡,4℃冰袋保存運(yùn)輸?shù)綄?shí)驗(yàn)室。


注意事項(xiàng):

  1.BRDU,檢測(cè)之前需動(dòng)物活體注射化學(xué)試劑brdu,細(xì)胞需用化學(xué)試劑brdu處理造模,否則無陽性。



僅供科研用途,不可用于臨床診斷!