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免疫熒光

鬼筆環(huán)肽染色

服務(wù)介紹:


鬼筆環(huán)肽(phalloidin)可特異性與細胞內(nèi)聚合微絲中的絲狀肌動蛋F-actin結(jié)合,通過藕聯(lián)的熒光素分子,從而顯示微絲骨架在細胞中的分布。與抗體相比,鬼筆環(huán)肽無物種限制,染色特異性極強,染色區(qū)和未染色區(qū)對比性非常清晰,而且標記后的肌動蛋白許多生理特性都得以維持。也適用于甲醛固定和去垢劑通透處理后的組織或細胞樣本




實驗結(jié)果展示:


  1、鬼筆環(huán)肽染色(細胞)-紅光

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實驗流程:


1.細胞固定并破膜:培養(yǎng)好的細胞爬片倒去培養(yǎng)基,用PBS洗。4%多聚甲醛固定15minPBS3次,每次5min,滴加0.1%TRITON,破膜20min.

2.加鬼筆環(huán)肽:爬片稍甩干后用組化筆在蓋玻片中間細胞分布均勻的位置畫圈(防止液體流走),加50-100μl鬼筆環(huán)肽工作液,室溫孵育2hPBS3次,每次5 min

3.DAPI復染細胞核:爬片用PBSPH7.4)洗滌3次,每次5min。去除PBS后在圈內(nèi)滴加DAPI染液,避光室溫孵育10min



送樣運輸要求:

  按細胞爬片準備流程,用PFA室溫固定細胞15min后用無菌PBS洗滌后用無菌PBS浸泡,4℃冰袋保存運輸?shù)綄嶒炇摇?/p>


僅供科研用途,不可用于臨床診斷!