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熒光試劑
熒光試劑

Bodipy綠（493/503）中性脂滴染料

規(guī)格：50μL

貨號(hào)：PN0115

價(jià)格：600元/50μL

產(chǎn)品特性


1746607889960592.pngBodipy（綠)-產(chǎn)品說明書.pdf


產(chǎn)品描述     BODIPY493/503 methyl bromide 是一種 BODIPY 染料。BODIPY 染料是一種具有強(qiáng)紫外吸收能力的小分子染料，其熒光峰比較尖銳，量子產(chǎn)率高。其對(duì)環(huán)境的極性和 pH 值相對(duì)不敏感，因此，在不同生理?xiàng)l件下相對(duì)穩(wěn)定。由于其結(jié)構(gòu)的非對(duì)稱性，BODIPY 具有多種衍生結(jié)構(gòu)產(chǎn)物。BODIPY 脂滴類染料可以很好的穿過細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部，通過在細(xì)胞內(nèi)的中性脂類上定位以進(jìn)行特異性染色，因此，該染料可用于標(biāo)記活細(xì)胞和固定細(xì)胞。最大激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)：493/503 nm。
    本產(chǎn)品提供的BODIPY 493/503（2500×）為5 mM儲(chǔ)存液，適用于大多數(shù)細(xì)胞，為了得到更為滿意的結(jié)果，可以適度調(diào)節(jié)染料濃度，BODIPY 493/503的終濃度一般為1-10 μM，最優(yōu)先的推薦終濃度為 2μM。
儲(chǔ)存與運(yùn)輸冰袋運(yùn)輸，-20℃保存，有效期6個(gè)月
使用方法?作液的配制 ：
?預(yù)熱好的??清細(xì)胞培養(yǎng)基或 PBS 稀釋儲(chǔ)存液，配制成 1-10 μM 的 BODIPY493/503 methyl bromide ?作液，即稀釋2500倍，則工作液濃度為2μM。
注：請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整 BODIPY493/503 methyl bromide ?作液濃度，且現(xiàn)?現(xiàn)配。
實(shí)驗(yàn)步驟細(xì)胞染?（懸浮細(xì)胞）：
1.將固定好的或者新鮮的細(xì)胞懸液，經(jīng)離?收集細(xì)胞，加? PBS 洗滌兩次，每次 5 min。細(xì)胞密度在 1×106/mL；
2.取一張潔凈的載玻片，組化筆畫圈圈住組織，晾干，往圈內(nèi)加入50-100μl的細(xì)胞懸液，制成細(xì)胞滴片，用槍頭混勻細(xì)胞，自然風(fēng)干；
3.取制做好的滴片，入純水洗滌2次，每次1min;
4.用PBST潤(rùn)洗玻片5-10s,稍刷干；
5.加? 100μl的 BODIPY493/503 methyl bromide ?作液，室溫孵育 5-30 min；
6.吸去染料工作液，用PBS潤(rùn)洗3次，每次5 min；
7.加入200μl的Dapi染液，室溫染色2min，用純水洗滌3次，每次2min；
8.用抗熒光淬滅封片劑封片，避光盒保存；
9.使?熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡進(jìn)?觀察。
細(xì)胞染?（貼壁細(xì)胞）
1.將貼壁細(xì)胞培養(yǎng)于?菌蓋玻?上；
2.從培養(yǎng)基中移出蓋玻?，吸除多余培養(yǎng)基；
3.新鮮細(xì)胞則加? 100 μL 染料?作液，輕輕晃動(dòng)使其完全覆蓋細(xì)胞，孵育 5-30 min；或者加入通用型組織固定液室溫固定15min,吸棄固定液，用PBS潤(rùn)洗孔板2-3次，每次5min，吸棄PBS后，加入100μlμL 染料?作液，輕輕晃動(dòng)使其完全覆蓋細(xì)胞，孵育 5-30 min；
4.吸去染料?作液，?培養(yǎng)基或者PBS洗 2-3 次，每次 5 min；
5.加入200μl的Dapi染液，室溫染色2min，用純水洗滌3次，每次2min；
6.用抗熒光淬滅封片劑封片，避光盒保存；
7.使?熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡進(jìn)?觀察。
組織染?（冰凍切片）
1.若為新鮮組織，使用OCT進(jìn)行包埋切片；若為固定組織，先用蔗糖進(jìn)行脫水處理，再用OCT進(jìn)行包埋切片，切片厚度8μm ；
2.自然風(fēng)干切片；
3.組化筆畫圈圈住組織，滴加100 μL 染料?作液覆蓋切片，室溫染色5-30min；
4.PBS洗去染料?作液，每次 5 min；
5.加入200μl的Dapi染液，室溫染色2min，用純水洗滌3次，每次2min；
6.用抗熒光淬滅封片劑封片，避光盒保存；
7.使?熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡進(jìn)?觀察。
注意事項(xiàng)1.請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整 BODIPY493/503 methyl bromide ?作液濃度與孵育時(shí)間。
2.實(shí)驗(yàn)建議進(jìn)?陽(yáng)性對(duì)照，將對(duì)照組細(xì)胞與 30 μM 油酸孵育 8 h 后進(jìn)?后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
3.本產(chǎn)品僅限于專業(yè)?員的科學(xué)研究?，不得?于臨床診斷或治療，不得?于?品或藥品。
4.為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴?次性?套操作。