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1.實(shí)驗(yàn)介紹
通過結(jié)晶紫初染和碘液媒染后,在細(xì)胞壁內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物。革蘭氏陽性菌的細(xì)胞壁較厚、肽聚糖網(wǎng)層次較多且交聯(lián)致密,在脫色處理時(shí),網(wǎng)孔會(huì)縮小,并且它不含類脂,在脫色處理時(shí)也不會(huì)出現(xiàn)縫隙,因此能把結(jié)晶紫與碘復(fù)合物牢牢留在壁內(nèi),使其仍呈紫色。革蘭氏陰性菌因其細(xì)胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差,在遇脫色劑時(shí),以類脂為主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋結(jié)晶紫與碘復(fù)合物的流出,因此脫色后呈無色,再經(jīng)番紅復(fù)染,革蘭氏陰性菌呈紅色。
2.實(shí)驗(yàn)流程
石蠟切片脫蠟至水,冰凍切片自然晾干→革蘭氏染色→烤干→封片。
懸液:制備細(xì)胞涂片→晾干→固定→革蘭氏染色→烤干→封片。
3.注意事項(xiàng)
(1)樣品固定要求:樣本放置于20倍樣本體積的固定液中固定24h以上,固定時(shí)樣品切勿冷凍結(jié)冰。
(2)運(yùn)輸要求:固定好的樣品常溫運(yùn)輸送樣;石蠟切片常溫運(yùn)輸,冰凍切片-20℃運(yùn)輸。
4.圖片
革蘭氏菌涂片: