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手動生化

Fe

服務(wù)介紹:

鐵是生物體內(nèi)重要的金屬元素之一,參與造血、氧氣運輸、增強免疫、某些酶合成與反應(yīng)活性等多種生理活動。隨著近些年鐵死亡概念的提出,鐵離子含量變化作為鐵死亡的特性之一,也表明鐵離子代謝過程與生物體的健康與疾病有著重要的關(guān)系。

名稱

規(guī)格

價格(元)

總鐵 Fe

反應(yīng)

10


實驗圖:




實驗結(jié)果展示:




實驗流程具體步驟以說明書為準(zhǔn)):

1. 樣品準(zhǔn)備

血清、血漿、透明液體狀樣本、動植物組織,細胞等

2. 檢測前準(zhǔn)備

處理樣本,配制試劑

3. 檢測步驟

加樣-加試劑-顯色反應(yīng)后酶標(biāo)儀讀數(shù)

4. 實驗結(jié)果

樣本OD值代入公式計算出結(jié)果,以EXCEL形式發(fā)出


送樣運輸要求:

1、動植物組織樣本(干冰運輸)

①動物處死后5min內(nèi)取樣,全程冰上操作,先取易降解的組織,如胰腺、腸、胃等,再取其它組織,組織塊至少取50mg以上(黃豆大?。=M織取好后用預(yù)冷的PBS輕輕漂洗掉樣本表面的血污,例如心、肝、脾、腎等血污較多的組織,可用預(yù)冷PBS清洗多次,直至血污清洗干凈,用濾紙吸干組織表面液體,立即放入EP管或凍存管中-80℃保存。

②腸,胃,血管,食管,子宮等標(biāo)本,取材后立即把組織切開用預(yù)冷PBS清洗多次,去除內(nèi)容物,用濾紙吸干組織表面液體,立即放入EP管或凍存管中-80℃保存。

③剛孵化的斑馬魚離心后至少提供黃豆大小的數(shù)量。

④視網(wǎng)膜需單獨剝離,小鼠至少需要4個視網(wǎng)膜合并,大鼠至少需要2個視網(wǎng)膜合并。

⑤皮膚樣本需去凈毛發(fā)。

2、血清樣本(干冰運輸)

全血標(biāo)本加到促凝管(黃色管蓋,)或者無菌無酶的EP管中室溫靜置2小時后于2-8℃ 3000rpm/min離心15min,取上清放于-20℃或-80℃保存,避免反復(fù)凍融。

3、血漿樣本(干冰運輸)

全血樣本置于肝素抗凝管內(nèi)綠色管蓋,采血量為抗凝管標(biāo)注體積的80%-100%,血量勿超過抗凝管標(biāo)注體積否則抗凝效果不佳,血量不少于80%標(biāo)注體積,否則樣本會被抗凝劑稀釋。輕輕顛倒混勻,30分鐘內(nèi)于2-8℃ 3000rpm/min離心15min,取上清放于-20℃或-80℃保存,避免反復(fù)凍融。

4、細胞樣本(細胞量至少107,細胞沉淀黃豆大小,干冰運輸)

貼壁細胞:①培養(yǎng)好的細胞棄培養(yǎng)基,加入PBS,用細胞刮沿一個方向輕輕刮下細胞,切記不要反復(fù)刮,避免細胞刮破。②細胞液收集至離心管內(nèi),4℃低速離心(不超過3000rpm)5min,去上清,收集細胞沉淀,細胞沉淀要有黃豆大小。

懸浮細胞:①將細胞及培養(yǎng)基一起吸入離心管中,4℃低速離心(不超過3000rpm)5 min,去上清,收集細胞沉淀。②加入1mL PBS溶液重懸細胞,將細胞轉(zhuǎn)移到1.5mL離心管中,4℃低速離心(不超過3000rpm)5min,去上清,收集細胞沉淀,細胞沉淀要有黃豆大小。

細胞上清:取細胞培養(yǎng)基于2-8℃,3000rpm/min離心15min取上清,于-20℃或-80℃保存,避免反復(fù)凍融。

備注:

1.不要寄送培養(yǎng)板或培養(yǎng)瓶,運輸過程中細胞容易脫落且造成細胞活力下降,培養(yǎng)板有漏液風(fēng)險,造成樣本污染。

2.有單獨需要加試劑處理細胞的指標(biāo)檢測,如總鐵,T-GSH/GSSG,需要先進行細胞計數(shù)再收集沉淀,細胞數(shù)目備注在實驗交接單上。

僅供科研用途,不可用于臨床診斷!