當(dāng)前位置:首頁 > 實(shí)驗(yàn)服務(wù) > 病理實(shí)驗(yàn) > 分子病理 > 免疫熒光
服務(wù)介紹:
活性氧簇ROS是由氧分子還原所形成的分子或者離子,大部分都是由線粒體產(chǎn)生的副產(chǎn)物,它們會(huì)在細(xì)胞代謝包括細(xì)胞內(nèi)呼吸和底物氧化過程中產(chǎn)生。適量的ROS是細(xì)胞必需的,因?yàn)镽OS參與維持細(xì)胞存活及生理功能所需的各種生活過程,如信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和基因表達(dá),但過量或過少的ROS都會(huì)誘導(dǎo)氧化應(yīng)激,破壞核酸、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、碳水化合物和細(xì)胞膜等,導(dǎo)致細(xì)胞死亡和組織破壞。
DCFH-DA本身沒有熒光,可以自由穿過細(xì)胞膜,進(jìn)入細(xì)胞后,被水解生成DCFH。而DCFH不能透過細(xì)胞膜。細(xì)胞內(nèi)的ROS可以氧化無熒光的DCFH生成有熒光的DCF。DCF被488nm激發(fā)光激發(fā)后,發(fā)射530nm的熒光信號,被FITC通道接收,檢測DCF的熒光就可以判定細(xì)胞內(nèi)活性氧ROS的水平。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果展示:
ROS結(jié)果圖
實(shí)驗(yàn)流程:
收集細(xì)胞-PBS洗滌細(xì)胞-細(xì)胞計(jì)數(shù)-裝載探針-孵育探針-上機(jī)檢測
送樣運(yùn)輸要求:
需要活細(xì)胞(只接武漢本地樣本,外地樣本不接)。
細(xì)胞匯合度高于70%(6 孔板),多提供2 個(gè)空白孔,做陰性和陽性對照。
如果細(xì)胞帶綠光,不能檢測。
僅供科研用途,不可用于臨床診斷!