實(shí)驗(yàn)介紹：

酶聯(lián)免疫（ELISA），利用抗原與抗體的特異性反應(yīng)將待測(cè)物與酶連接，然后TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。根據(jù)顏色反應(yīng)定量目標(biāo)抗原或抗體含量。該技術(shù)可用于檢測(cè)大分子抗原和特異性抗體等，具有快速、靈敏、簡(jiǎn)便、載體易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)

實(shí)驗(yàn)流程：

組織/細(xì)胞研磨取上清 →  加樣→ 溫育→ 加抗體→ 溫育→ 洗板→ 加酶結(jié)合物→ 溫育→ 洗板→ 加顯色底物→ 終止反應(yīng)→ 結(jié)果測(cè)定  

送樣運(yùn)輸要求：

1)、動(dòng)植物組織樣本（干冰運(yùn)輸）

準(zhǔn)確稱取動(dòng)物組織重量按重量（mg）：體積（ul）=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)（推薦0.86%或0.9%的生理鹽水），冰水浴條件下，機(jī)械勻漿，制備成10%的勻漿液，2500~3000轉(zhuǎn)/分鐘，離心10分鐘，取上清液進(jìn)行測(cè)定。

2)、血清樣本（干冰運(yùn)輸）

全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜（GLU檢測(cè)請(qǐng)勿全血樣本放置過(guò)夜取血清）后于2-8℃ 3000轉(zhuǎn)/分離心15min，取上清即可立即檢測(cè)；或進(jìn)行分裝，并將標(biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心，然后檢測(cè)。

3)、血漿樣本（干冰運(yùn)輸）

可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃3000轉(zhuǎn)/分離心15min，取上清即可立即檢測(cè)；或進(jìn)行分裝，并將標(biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心，然后檢測(cè)。

4)、細(xì)胞樣本

貼壁細(xì)胞：將細(xì)胞用PBS沖洗2次后，用細(xì)胞刮將細(xì)胞小心刮下來(lái)，將培養(yǎng)液3000轉(zhuǎn)/分，離心10min。棄上清留細(xì)胞沉淀，干冰運(yùn)輸。

懸浮細(xì)胞：將培養(yǎng)液3000轉(zhuǎn)/分，離心10min。棄上清留細(xì)胞沉淀，干冰運(yùn)輸。

細(xì)胞上清：標(biāo)本于2-8℃，3000轉(zhuǎn)/分離心15min取上清，上清立即用于實(shí)驗(yàn)，或分裝后于-20℃或-80℃保存。避免反復(fù)凍融。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果展示：