Opal 工作原理
多標記免疫熒光染色存在諸多困難,例如抗體種屬交叉反應、多輪處理后的標簽穩(wěn)定性、高低信號之間的平衡以及弱表達標記物的檢
測等。因而在 FFPE 組織或冷凍切片中檢測三種或更多生物標記物成為限制研究者的一大障礙。
Opal 是利用TSA 技術開發(fā)的多標記復染方案,利用TSA 信號不受微波影響,并能在抗體去除后保留信號的原理??梢詾榻M織樣品特
別是 FFPE (福爾馬林固定石蠟包埋)樣品進行染色,并且允許在同一樣本中 使用同一種屬來源的不同一抗進行多標記識別。配合
Vectra多光譜成像分析系統(tǒng),可以獲得高信噪比(扣除 背景熒光)的圖像和進行精準的批量定量分析。
Opal 獨特優(yōu)勢
◆同一切片實現(xiàn)多達7種生物標記染色(含核染)
◆檢測靈敏度較普通 IHC 提高近100倍
◆可使用同一種屬來源的一抗,且無干擾
◆降低一抗使用量從而節(jié)約成本
◆微波去除一抗/二抗干擾
◆洗脫去非特異性染色
實驗原理
Opal 是一套基于酪酰胺信號放大技術(TSA,TyramideSignal Amplification)的多標記免疫組化染色方案,為組織樣品特別是 FFPE
(福爾馬林固定石蠟包埋)樣品進行染色,并且允許同一樣本中使用同一種屬來源 的不同一抗進行多標記復合染色。配合多光譜成像
分析系統(tǒng),可以獲得高信噪比(扣除背景自發(fā)熒光)的圖像, 甚至是多達7種標記的同步染色和共定位及定量分析。