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保存運輸方法
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分子生物學(xué)檢測標(biāo)本收集保存運輸方法

作者：admin2025-03-10 09:24 熱度：224


實驗項目取樣及運輸要求
引物合成基因名稱和種屬，或基因ID號
miRNA引物合成基因名稱和種屬，或基因ID號，或成熟的RNA序列；成熟的miRNA有3p和5p之分，故需要告知設(shè)計3p還是5p, 可以參考相關(guān)文獻(xiàn)。
RNA電泳1、動物組織：常規(guī)組織100mg,脂肪組織，結(jié)締組織，纖 維化組織適當(dāng)增加。將組織剪切成合適大小后(建議組織塊  長寬高均不大于0.5cm),迅速完全漫泡于5~10倍體積的 RNAsolid"試劑中。(注意：已浸入RNAsolid試劑中的組   織經(jīng)平衡一段時間后，可從溶液中取出，切成更小的組織
塊再重新放回RNAsolid試劑中；有些液體滲透性比較弱  的組織如骨頭等，不適合用RNAsolid試劑進(jìn)行RNA保護(hù)。
2、植物組織：新鮮的葉、果肉、種子最少100mg。將數(shù)
葉嫩莖組織切成合適的大小(建議長寬高均不大于0.5cm) 后迅速完全漫泡于5~10倍體積的RNAsolidW試劑中。 (注意：某些植物組織天生具有的屏障，如葉子表面的蠟層  可陽礙RNAsolid試劑的滲透，對于此類組織，通常需破壞
這些屏障層以允許溶液的漫透。)
3、細(xì)胞等樣本：收集不少于10個細(xì)胞的沉淀(用PBS清 洗1-2次)。之后迅速加入5～10倍體積的RNAsolidW
4、酵母、細(xì)菌等樣本：離心棄上清，收集小米粒大小的單
菌體沉淀 。
5、全血：最少1mL新鮮血液EDTA抗凝管。
7、RNA樣品：OD260/280為1.8-2.0,濃度>100ng/uL
體積>15uL
8、cDNA:cDNA原液>20μL。
RNA提取逆轉(zhuǎn)錄1、加入有RNAsolid試劑的樣本可在37℃保存1~2天，2天以后部分組織中的RNA會開始降解；室溫(25℃)穩(wěn)定保存1周不會有明顯的RNA降解發(fā)生；大 部分樣品置于BNAsolid試劑中，4℃條件下可穩(wěn)定保存1個月，不會有明顯的RNA降解發(fā)生；長期存放可先將保存在RNAsolidW試劑中的樣本4℃浸透過夜， 然后將RNAsolid試劑吸出棄去，再將樣本放入-20℃ 或 - 80℃長期穩(wěn)定保存3～5年。
mRNA OPCR檢測2、全血： -20℃運輸。
miRNAQPCR檢測(cDNA必須能檢測3、血清：干冰運輸
miRNA基因4、RNA樣品：干冰運輸
circRNAQPCR檢測5、CDNA:干冰運輸
IncRNAQPCR檢測
普通PCR1、動物組織：100mg(黃豆大小),脂肪組織，結(jié)締組織，纖維化組織適當(dāng)增加，干冰運輸。
2、細(xì)胞：1×10?個細(xì)胞。將細(xì)胞沉淀收集到1.5ml離心管中加入1mitrizol裂解液裂解，干冰運輸，干冰運輸。
3、全血：最少1.5mL新鮮血液EDTA抗凝管， -20℃運輸。
4、植物：新鮮的葉、果肉、種子等最少需300 mg,干冰運輸。
5、CDNA和基因組DNA,干冰運輸。
DNA提取1、動物組織：100 mg(黃豆大小),最少50mg(綠豆大小),脂肪組織，結(jié)締組織，纖維化組織適當(dāng)增加，干冰運輸。
2、細(xì)胞：1×10°個細(xì)胞，干冰運輸(不需要加裂解液)
3、全血：最少1.5mL新鮮血液EDTA抗凝管， -20℃運輸
4、細(xì)菌：約30μL單菌沉淀，干冰運輸。
DNA定量1、動物組織：100mg(黃豆大小),最少50mg(綠豆大小),脂肪組織，結(jié)締組織，纖維化組織適當(dāng)增加，干冰運輸。
2、細(xì)胞：1×10°個細(xì)胞，細(xì)胞沉淀，于冰運輸。
3、全血：2mL,最少1.5mL新鮮血液EDTA抗凝管， -20℃運輸。
4、所有要提取基因組DNA的樣本都不要加入trizol或者RNA later試劑保存或運輸。
甲基化檢測1、動物組織：100mg(黃豆大小),最少50mg(綠豆大小),脂肪組織，結(jié)締組織，纖維化組織適當(dāng)增加，干冰運輸
2、細(xì)胞：1×10°個細(xì)胞沉淀，干冰運輸。
3、全血：最少1.5mL新鮮血液EDTA抗凝管， -20℃運輸。
4、DNA:體積≥ 50μL,濃度≥ 50ng/L。