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Tunel

Tunel

實驗介紹:

TUNEL技術(shù)可對組織或細胞中凋亡小體或單個凋亡細胞進行染色,能準確反映細胞凋亡典型的生物化學和形態(tài)特征。凋亡細胞內(nèi)內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶被激活而將自身染色體DNA切斷成缺口或3-OH末端片段這一特點,利用脫氧核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶將標有標記物(如地高辛,生物素或熒光素)的脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移到3-OH末端,再用免疫組化法或免疫熒光檢測凋亡細胞


實驗流程: 

白光: 切片脫蠟至水--蛋白酶K修復--孵育tunel反應(yīng)液--孵育Streptavidin-HRP反應(yīng)液-- DAB顯色--蘇木素染核--脫水封片--鏡檢拍照

熒光:脫蠟至水--蛋白酶K修復--破膜通透--孵育tunel反應(yīng)液--DAPI染核--抗熒光素淬滅劑封片-- 鏡檢拍照


注意事項:

(1)石蠟切片:組織取樣后應(yīng)立即置于固定液中,常溫運輸切勿冷凍結(jié)冰;

(2)冰凍切片:-20度運輸


實驗結(jié)果展示:

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Tunel  綠                                        Tunel  綠


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Tunel 白光                                      Tunel 白光